新冠核酸檢測實驗活動的污染控制措施及相關管理要求

科研實驗室從事新冠核酸檢測實驗活動所涉及的檢測樣本與臨床檢測實驗室的檢測樣本不同。臨床檢測樣本通常病毒載量較低，且以無機緩沖液懸浮和稀釋檢測樣本，而科研實驗室的檢測樣本通常是經過培養的病毒樣本，或采集感染動物組織和體液所制備的樣本，所以樣本中病毒載量和有機質含量較高。因此，科研實驗室在從事新冠核酸檢測實驗活動時，需要依據檢測樣本的特性，制定可靠的污染控制措施和管理規范。

作者依據國家公開發布的新冠檢測實驗室管理規范和技術指南，結合本單位的實驗室安全管理實踐，總結出新冠核酸檢測實驗活動的污染控制措施和相關管理要求。

1、依據國家衛健委2020年發布的《新型冠狀病毒感染的肺炎防控方案(第二版)》附件4《新型冠狀病毒感染的肺炎實驗室檢測技術指南》，及《新型冠狀病毒實驗室生物安全指南（第二版，國衛辦科教函﹝2020﹞70?號）》的要求，未經培養的臨床樣本，可在生物安全二級實驗室進行樣本滅活、核酸提取和檢測、抗原檢測、血清學檢測、生化分析等實驗操作。

2、經過培養的病毒樣本，或采集感染動物組織或體液所制備的樣本，須在生物安全三級實驗室采用可靠的方法滅活后，轉移至生物安全二級實驗室進行核酸提取和檢測、抗原檢測、血清學檢測、生化分析等實驗操作。

2、而在生物安全三級實驗室經過培養的病毒樣本，或采集感染動物組織或體液所制備的樣本，在帶出實驗室進行核酸提取之前，須采用QIAGEN試劑盒的AVL裂解液+無水乙醇的方法滅活培養后的病毒樣本（在140ul樣本中加入560ul AVL裂解液和5ul Carrier RNA，振蕩混勻15sec，靜置作用10min后，加入560ul 無水乙醇，充分混勻15sec，靜置作用10min），采用Trizol+氯仿（在50-100mg組織制備的研磨上清液、10cm2貼壁細胞或5×106懸浮細胞中，加入1ml Trizol試劑，振蕩混勻15sec，靜置作用5min后，加入250ul氯仿，充分混勻15sec，靜置作用5min）的方法滅活經培養的病毒樣本，或采集感染動物組織或體液所制備的樣本。

3、所有滅活的樣本，在移出生物安全柜及帶出生物安全三級實驗室之前，必須分別對主容器的外表面和次級包裝容器的內外表面，用75%乙醇或0.5%的次氯酸鈉作用5 min進行有效的消毒和滅菌。如使用次氯酸鈉消毒劑，在達到有效作用時間后，應使用75%乙醇或清水擦拭去除殘余的消毒劑，減少含氯消毒劑對容器等的腐蝕作用。